PEMERIKSAAN TRIGLISERIDA DALAM SERUM

BAB I PENDAHULUAN

I.1. Latar Belakang

Praktikum kimia klinik dapat digunakan untuk melatih mahasiswa agar dapat belajar dan mengenal pemeriksaan trigliserida dalam serum. Mahasiswa mampu menganalisis dan menginterpretasikan data klinis pemeriksaan trigliserida dalam spesimen serum.

Trigliserida adalah penyebab utama penyakit-penyakit arteri dan biasanya dibandingkan dengan menggunakan lipoprotein elektroforesis. Trigliserida adalah lemak darah yang dibawah oleh serum lipoprotein. Bila terjadi peningkatan trigliserida maka terjadi peningkatan VLDL yang menyebabkan hiperlipoproteinemia.

Serum merupakan bagian dari cairan tubuh yang bercampur dengan darah. Serum sendiri dapat diartiakan sebagai cairan tanda sel darah dan fator koagulasi atau fibrinogen.Serum merupakan juga sebuah plasma darah tanpa adanya fibrinogen. Serum ini terdari dari 4 jenis berdasarkan komponen yang terkandung didalamnya yaitu, serum albumin,serum globulin, serum lipoprotein dan serum wewenang. Masing-masing jenis serum memiliki fungsi yang berbeda meskipun dalam satu larutan plasma darah.

Trigliserida adalah substansi lemak lain dalam darah yang dapat mempengaruhi risiko terkena penyakit jantung. Sebagian besar lemak dalam makanan dan dalam tubuh anda berada dalam bentuk trigliserida. Kadar trigliserida yang tinggi berhubungan dengan risiko penyakit jantung, demikian juga dengan kolesterol. Peningkatan trigliserida dapat disebabkan oleh kelebihan berat badan ( obesitas ), aktivitas fisik, merokok, komsumsi alcohol berlebihan dan diet tinggi karbohidrat, kelainan genetik dan lain sebagainya. Orang dengan trigliserida tinggi biasanya memiliki nilai LDL ( kolesterol jahat ) yang tinggi dan nilai HDL ( kolesterol baik ) yang rendah dan nilai kolesterol total yang tinggi.

Asupan makanan yang mengandung kadar lemak jenuh yang tinggi dapat meningkatkan efek trigliserida di dalam tubuh seseorang. Jika kadar trigliserida meningkat, maka kadar kolesterol pun akan meningkat pula. Keberadaan kolesterol dan trigliserida dalam darah memang sangat dibutuhkan oleh tubuh. Jika makanan yang dikonsumsi banyak mengandung lemak jenuh berlebihan, maka mengakibatkan kadar kolesterol yang berlebihan. Hal ini akan menimbulkan ancaman dan masalah yang serius, terutama pada penyakit pembuluh darah yang disebut aterosklerosis. Penyakit ini dapat memicu timbulnya penyakit jantung coroner dan stroke.

Pembagian kolesterol terdiri dari 2 yaitu LDL atau disebut juga kolesterol jahat yang bila jumlahnya berlebih di dalam darah akan diendapkan pada dinding pembuluh darah membentuk bekuan yang dapat menyumbat pembulun darah Sedangkan Kolesterol HDL, adalah kolesterol baik, yang mempunyai fungsi membersihkan pembuluh darah dari kolesterol LDL yang berlebihan.

I.2. Maksud Praktikum

Adapun maksud dari percobaan ini adalah untuk mengukur kadar trigliserida dalam tubuh dan menginterpretasikan secara klinis.

I.3. Tujuan Praktikum

Adapun tujuan dari percobaan ini adalah untuk menentukan kadar trigliserida dalam serum darah dengan melihat absorbansinya menggunakan alat spektrofotometer.

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

II.1.        Trigliserida

Trigliserida merupakan asam lemak yang dibentuk dari esterifikasi tiga molekul asam lemak menjadi satu molekul gliserol. Jaringan adiposa memiliki simpanan trigliserid yang berfungsi sebagai ‘gudang’ lemak yang segera dapat digunakan. Dengan masuk dan keluar dari molekul trigliserida di jaringan adiposa, asam-asam lemak merupakan bahan untuk konversi menjadi glukosa (glukoneogenesis) serta untuk pembakaran langsung untuk menghasilkan energy (Dipiro, 2008).

Trigliserida adalah penyebab utama penyakit-penyakit arteri dan biasanya dibandingkan dengan menggunakan lipoprotein elektroforesis. Trigliserida adalah lemak darah yang dibawah oleh serum lipoprotein. Bila terjadi peningkatan trigliserida maka terjadi peningkatan VLDL yang menyebabkan hiperlipoproteinemia (Baron, 1995).

Lipid adalah senyawa yang mengandung karbon dan hidrogen yang tidak larut dalam air (hidrofobik) tetapi larut dalam pelarut organik. Komponen lipid utama yang dapat dijumpai dalam plasma adalah trigliserida, kolesterol dan fosfolipid (Baron, 1995).

Asam lemak dapat berasal dari makanan, tetapi juga berasal dari kelebihan glukosa yang diubah oleh hati dan jaringan lemak menjadi energi yang dapat disimpan. Lebih dari 95% lemak yang berasal dari makanan adalah trigliserida. Proses pencernaan trigliserida dari asam lemak dalam diet (eksogenus), dan diantarkan ke aliran darah sebagai kilomikron (droplet lemak kecil yang diselubungi protein), yang memberikan tampilan seperti susu atau krim pada serum setelah mengkonsumsi makanan yang tinggi kandungan lemaknya (Baron, 1995).

Kolesterol berasal dari makanan dan sintesis endogen di dalam tubuh. Sumber kolesterol dalam makanan seperti kuning telur, susu, daging, lemak (gajih), dan sebaginya terutama dalam keadaan ester. Dalam usus, ester tersebut kemudian dihidrolisis oleh kolesterol esterase yang berasal dari pankreas dan kolesterol bebas yang terbentuk diserap oleh mukosa usus dengan kilomikron sebagai alat transport ke sistem limfatik dan akhirnya ke sirkulasi vena. Kira-kira 70% kolesterol yang diesterifikasi (dikombinasikan dengan asam lemak), serta 30% dalam bentuk bebas (Dipiro, 2008).

Serum adalah cairan yang tersisa setelah darah menggumpal atau membeku. Koagulasi mengubah semua fibrinogen menjadi fibrin yang padat dan dalam prosesnya mengonsumsi factor VIII, factor V, dan protrombin. Protein-protein koagulasi lainnya dan protein yang tidak terkait dengan hemostasis, tetap berada dalam serum dengan kadar serupa dengan dalam plasma. Serum normal tidak mengandung fibrinogen, protrombin, factor VIII, factor V,  dan factor XIII, tetapi mengandung factor XII, XI, X, IX, dan VII. Apabila proses koagulasi berlangsung secara abnormal, serum mungkin mengandung sisa fibrinogen atau protrombin yang belum dikonversi (Ronald,2004 ).

Jantung adalah organ berongga dan memiliki empat ruang yang terletak antara kedua paru-paru di bagian tengah rongga toraks. Dua pertiga jantung terletak di sebelah kiri garis midsernal. Jantung dilindungi mediastinum. Jantung berukuran kurang lebih sebesar kepalan tangan pemiliknya. Bentuknya seperti kerucut tumpul. Ujung atas yang lebar (dasar) mengarah ke bahu kanan, ujung bawah yang mengerucut (aspek) mengarah ke panggul kiri (Sloane, 2003).

Hati (liver) merupakan organ terbesar dalam tubuh manusia. Di dalam hati terjadi proses-proses penting bagi kehidupan kita, yaitu proses penyimpanan energi, pembentukan protein dan asam empedu, pengaturan metabolisme kolesterol, dan penetralan racun atau obat yang masuk dalam tubuh kita. Apabila fungsi hati terganggu maka akan terjadi dampak yang kompleks pada kesehatan tubuh (Alfiansyah, 2012).

II.2   Interpretasi Klinis

Penurunan kadar: ß-lipoproteinemia kongenital, hipertiroidisme, malnutrisi protein. Peningkatan kadar: hiperlipoproteinemia, hipertensi, hipotiroidisme, sindrom nefrotik, trombosis serebral, sirosis alkoholik, DM: maksimal 150 mg/dL. Dalam suatu studi, kenaikan HDL sebesar 1% berarti menurunkan risiko penyakit jantung koroner arteri sebesar 2%. Dalam studi yang sama, partisipan dengan kadar kolesterol HDL tertinggi mengalami penurunan risiko penyakit jantung koroner setengahnya dibandingkan partisipan dengan kadar kolesterol HDL terendah. Sebagian besar orang harus mencapai kadar 60 mg/dL atau lebih. Jika di bawah 40 mg/dL akan meningkatkan risiko penyakit jantung. Pada pria, kadar kolesterol HDL rata-rata berkisar 40-50 mg/dL (Majid, 2010).

Nilai Rujukan (Pearce, 2006)

Dewasa          :           - 12-29 tahun           : 10 – 140 mg/dL

- 30-39 tahun           : 20 – 150 mg/dL

- 40-49 tahun           : 30 – 160 mg/dL

         - > 50    tahun          : 40 – 190 mg/dL

Bayi                :           5-40 mg/dL

 Anak 5-11 tahun : 10-135 mg/dL

II.3 Patofisiologi

Kadar trigliserida yang meningkat dapat menyebabkan pengerasan pembuluh darah yang disebut Arteri. Keadaan ini disebut “Atherosclerosis”, yang meningkatkan resiko stroke, serangan jantung.Hipertrigliseridemia sering sebagai petanda ada penyakit lain, dapat pula meningkatkan risiko penyakit jantung koroner, stroke. Kegemukan, meningkatnya lingkar perut karena bertambahnya lemak dipinggang dan dikenal sebagai “metabolic syndrome” yang disertai tekanan darah tinggi, diabetes dan kadar hormon trioid yang rendah (hipotiroidi), penyakit hati (liver disease), gangguan ginjal atau suatu kelainan genetik yang jarang dimana ada kelainan cara tubuh anda mengubah lemak menjadi energi (Rubenstein, 2005).

Ateriosklerosis, adalah suatu penyakit yang ditandai dengan penebalan yang ditandai dengan penebalan dan hilangnya elastisitas dinding arteri. Dikenal 3 bentuk arteriosclerosis yaitu aterosklerosis, arterioskleriosis Monckeberg dan arteriolosclerosis. Aterosklerosis adalah bentuk arteriosclerosis yang paling umum ditemukan, ditandai dengan terdapatnya aterom pada bagian intima arteri yang berisi kolesterol, ditandai dengan terdapatnya aterom pada bagian intima arteri yang berisi kolesterol, zat lipoid dan lipofag. Pembuluh darah yang terkena adalah arteri besar dan sedang yaitu pembuluh serebral, vertebral, koroner, renal, aorta dan pembuluh di tungkai (Ganiswarna, 2007).

BAB III KAJIAN PRAKTIKUM

III.1.   Alat yang dipakai

Adapun alat yang digunakan yaitu tabung sentrifuge, kuvet, rak tabung, gelas ukur 100 ml, sentrifuge, spektrofotometri, mikropipet.

III.2.   Bahan Praktikum

Adapun bahan yang digunakan pada praktikum ini yaitu aquades, darah, es batu, methanol, reagen RGT , dan tisu.

III.3.   Cara Kerja

1.  Penyiapan serum

Disiapkan alat dan bahan lalu dimasukkan darah ke dalam tabung sentrifuge. Disentrifuge selama ± 15 menit pada kecepatan 6000 rpm, kemudian diambil serum darah dan dimasukkan dalam tabung reaksi.

2.  Pengukuran absorban blanko

Disiapkan alat dan bahan, dipipet 10 µl aquadest ke dalam kuvet kemudian ditambahkan 1000 µl reagen RGT. Diinkubasi pada suhu 25^oC selama 20 menit. Kemudian diukur absorban pada spektrofotometer dengan panjang gelombang 546 nm.

3.  Pengukuran absorban standar

Disiapkan alat dan bahan, dipipet 10 µl larutan standar ke dalam kuvetkemudian ditambahkan 1000 µl reagen RGT. Diinkubasi pada suhu 25^oC selama 20 menit. Diukur absorban pada spektrofotometer dengan panjang gelombang 546 nm.

4.  Pengukuran absorban sampel

Disiapkan alat dan bahan, dipipet 10 µl serum darah ke dalam kuvet kemudian ditambahkan 1000 µl reagen RGT. Diinkubasi pada suhu 25^oC selama 20 menit. Diukur absorban pada spektrofotometer dengan panjang gelombang 546 nm.

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

IV.1.  Hasil

IV.1.1 Tabel data pengamatan

No.	Trigliserida
	Standar	sampel
1.	0,952	0,442
2.	0,952	0,631

IV.1.2 Perhitungan Nilai Data Klinis

Kelompok 1

Dik      : Absorban sampel               = 0,442

              Absorban standar              = 0,952

              Konsentrasi standar          = 0,2 g/dL

Dit       : trigliserida....?

Penye :

  Trigliserida =   x konsentrasi standar

=  x 0,2 g/dL

= 0,09286 g/dL

= 92,86 mg/dL

Kelompok II

Dik      : Absorban sampel   = 0,631

              Absorban standar  = 0,132

              Konsentrasi standar          = 0,2 g/dL

Dit       : Trigliserida....?

Penye :

 Trigliserida =   x konsentrasi standar

                                    =  x 0,2 g/dL

                                    = 0,132 g/dL

                                     = 132 mg/dL

IV.2.      Pembahasan

Trigliserida adalah substansi lemak lain dalam darah yang dapat mempengaruhi risiko terkena penyakit  jantung. Sebagian besar lemak dalam makanan dan dalam tubuh anda berada dalam bentuk trigliserida. Kadar trigliserida yang tinggi berhubungan dengan risiko penyakit jantung, demikian juga dengan kolesterol. Peningkatan trigliserida dapat disebabkan oleh kelebihan berat badan (obesitas), aktivitas fisik, merokok, komsumsi alcohol berlebihan dan diet tinggi karbohidrat, kelainan genetik dan lain sebagainya. Orang dengan trigliserida tinggi biasanya memiliki nilai LDL (kolesterol jahat) yang tinggi dan nilai HDL (kolesterol baik) yang rendah dan nilai kolesterol total yang tinggi.

LDL berasal dari katabolisme VLDL, bertugas mengangkut kolesterol dalam plasma darah ke jaringan perifer untuk keperluan pertukaran zat. LDL mengandung 45% kolesterol. LDL ini mudah sekali menempel pada dinding pembuluh koroner sehingga menimbulkan kerak kolesterol (plak). Itu sebabnya LDL sering disebut sebagai “kolesterol jahat”.

HDL dibentuk oleh sel hati dan usus, bertugas menyedot timbunan kolesterol di jaringan tersebut, lalu mengangkutnya ke hati dan selanjutnya membuangnya ke dalam empedu. Karena itu maka HDL disebut sebagai “kolesterol baik”. Bila HDL rendah, maka kolesterol akan dideposit pada jaringan arteri.

VLDL terutama dibentuk oleh sel hati, sebagian oleh usus. VLDL terutama terdiri dari trigliserid endogen yang dibentuk oleh sel hati dari karbohidrat. Ia bertugas membawa kolesterol yang dikeluarkan dari hati ke jaringan otot untuk disimpan sebagai cadangan energi. Sedangkan Very High Density Lipoprotein (VHDL) tidak memiliki kandungan trigliserida dan kolesterol.

Kolesterol adalah lemak berwarna kekuningan dan berupa seperti lilin yang diproduksi oleh tubuh manusia terutama di dalam hati. Kolesterol merupakan lemak yang penting namun jika terlalu berlebihan dalam darah dapat membahayakan kesehatan, bila ditinjau dari sudut kimiawi kolesterol diklasifikasikan ke dalam golongan lipid (lemak) berkomponen alkohol steroid.

Tubuh memperoleh kolesterol dari dua sumber yaitu makanan dan sintesis denovo.Meskipun semua jaringan hewan dapat menjalankan proses 12 sintesis kolesterol, namun sebagian besar kolesterol disintesis di hati. Sintesis kolesterol terdiri dari tiga tahap, yaitu:

1.Pembentukan asam mevalonat dari asetat

2. Pembentukan skualindari asam mevalonat

3. Pembentukan sterol dari skualin

Asam mevalonat terbentuk dari tiga molekul asetil Ko A yang berkondensasi melalui pembentukan senyawa antara B-hidroksi-B-metilglutaril Ko A ( HMG-Ko A). Tahap reaksi pertama dikatalis oleh HMG-Ko A sintase. Dua molekul NADPH dipakai sebagai koenzim pada tahap reaksi kedua yang dikatalisis oleh HMG-KoA reduktase. Selanjutnya mevalonat diubah menjadi skualin. Pada tahap ini dibutuhkan NADPH sebagai pereduksi. Akhirnya, skualin mengalami konversi menjadi kolesterol dengan bantuan skualin monooksigenase.

Serum merupakan bagian dari cairan tubuh yang bercampur dengan darah. Serum sendiri dapat diartiakan sebagai cairan tanda sel darah dan fator koagulasi atau fibrinogen.Serum merupakan juga sebuah plasma darah tanpa adanya fibrinogen. Serum ini terdari dari 4 jenis berdasarkan komponen yang terkandung didalamnya yaitu, serum albumin,serum globulin, serum lipoprotein dan serum wewenang. Masing-masing jenis serum memiliki fungsi yang berbeda meskipun dalam satu larutan plasma darah.

Adapun interpretasi klinis pada penurunan kadar trigliserida dapat menyebabkan ß-lipoproteinemia kongenital, hipertiroidisme, malnutrisi protein. Sedangkan pada peningkatan kadar dapat menyebabkan hiperlipoproteinemia, hipertensi, hipotiroidisme, sindrom nefrotik, trombosis serebral, sirosis alkoholik, DM: maksimal 150 mg/dL.

Pada pengambilan darah dilakukan pada vena cubiti. Caranya yaitu dengan membersihkan tempat yang akan diambil darahnya dengan kapas alkohol, dibiarkan kering kemudian dipasang torniquit pada lengan atas dan tangan dikepal. Pembendungan sebaiknya jangan terlalu erat, kemudian kulit ditusuk dengan jarum sampai masuk kedalam lumen vena, selanjutnya penghisap ditarik perlahan-lahan sampai jumlkah darah yang dinginkan, pembendungan dilepas kan dan kapas diletakkan diatas jarum kemudian dicabut. Bekas tusukan ditekan dengan kapas.

Pada percobaan ini, reaksi yang terjadi adalah enzim lipase akan memperantarai hidrolisis trigliserida menjadi gliserol dan asam-asam lemak. Selanjutnya gliserol ini akan mengalami fosfatasi dengan bantuan enzim gliserol kinase yang akan menghasilkan gliserol-3-fosfat. Kemudian gliserol-3-fosfat akan dioksidasi menghasilkan dihidroksi-aseton-fosfat dan hidrogen peroksida (H₂O₂). Pada tahap selanjutnya, hidrogen peroksida inilah yang akan bereaksi dengan 4-aminofenazon dan 4-klorofenol dengan bantuan enzim peroksidase membentuk kompleks kuinonimin yang berwarna merah muda yang kemudian dapat diukur secara fotometrik.

Tujuan dilakukan pengujian trigliserida dan HDL adalah untuk mengetahui keadaan kolesterol dalam tubuh yang merupakan salah satu penyebab penyakit – penyakit arteri.

Sebelum dilakukan pengujian dilakukan terlebih dahulu darah disentrifuge selama 15 menit dengan kecepatan 6000 rpm, hal ini dilakukan untuk memisahkan antara serum dan plasma darah.

Adapun cara kerjanya yaitu pertama disiapkan larutan blanko lalu dipipet 10 µL aquadest ke dalam kuvet lalu ditambahkan 1000 µL reagen Albumin lalu diinkubasi pada suhu 25^o selama 20 menit diukur absorban pada spektrofotometer dengan panjang gelombang 546 nm. Setelah itu dilakukan pengukuran absorban standar, pertama disiapkan alat dan bahan lalu dipipet 10 µL larutan standar ke dalam kuvet kemudian ditambahkan 1000 µL reagen Albumin, diinkubasi pada suhu 25^o selama 20 menit lalu diukur absorban pada spektrofotometer dengan panjang gelombang 546 nm.

Pada percobaan ini yang diambil adalah serumnya setelah darah disentrifuge, alasan pengambilan serum karena di bagian serum itu terdapat asam lemak  dalam hal ini trigliserida dan albumin dan apa bila bagian yang mengendapnya diambil sulit untuk dibaca oleh alat spektrofometer.

Serum yang telah dipisahkan di pipet sebanyak 10 µL dan dimasukkan ke dalam kuvet dan ditambah dengan RGT sebanyak 1 mL. Alasan menggunakan RGT karena yang kita ingin mengetahui kadar trigliserida dalam sampel. Setelah itu sampel diinkubasi pada suhu ruangan selama 30 menit. Alasan penyimpanan ini dimaksudkan supaya proses reaksi antara serum dengan reagen RGT terjadi dengan sempurna. Selanjutnya diukur dengan menggunakan panjang gelombang 546 nm pada spektrofotometer karena sampel darah mempunyai panjang gelombang sinar tampak (380-780 nm). Dilakukan juga perlakuan yang sama untuk pengukuran absorban blanko dan standar.

Hasil yang diperoleh pada pengujian untuk pemeriksaan trigliserida adalah spesimen trigliserida dari darah kelompok satu 92,86 mg/dL masuk dalam nilai rujukan yaitu 10-140 mg/dL sehingga probandus pada kelompok satu memiliki trigliserida (kolesterol) yang normal, pada kelompok dua 132 mg/dL hal ini dinyatakan normal karena masuk dalam range nilai rujukan yaitu 10-140 gr/dL.

BAB V PENUTUP

V.1 Kesimpulan

Adapun Kesimpulan dari Praktikum nilai Pemeriksaan triglisrida dalam serum kadar trigliserida dalam serum yaitu kelompok satu 92,86 mg/dL masuk dalam nilai rujukan yaitu 10-140 mg/dL sehingga probandus pada kelompok satu memiliki trigliserida (kolesterol) yang normal, pada kelompok dua 132 mg/dL hal ini dinyatakan normal karena masuk dalam range nilai rujukan yaitu 10-140 gr/dL.

V.2 Saran

Seharusnya alat dan bahan dilengkapi, sehingga lebih mengefesienkan waktu.

DAFTAR PUSTAKA

Anonim., 2015, Tuntunan Praktikum Kimia Klinik, UMI press: Makassar.

Baron ,D.N., 1995, Kapita Selekta patologi Klinik Buku Kedokteran EGC, Jakarta.

Dipiro, J.T., 2008, Pharmacotherapy A Pathophysiologic Approach, The McGraw-Hill Companies., United States of America.

Ganiswarna, S., 2007, Farmakologi dan Terapi Edisi 5, FKUI, Jakarta.

Majid, C., 2010, Ilmu Pemantapan Serum, Penerbit Buku Kedokteran: EGC, Jakarta

Ronald, A, S. 2004. “Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan Laboratorium”. Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta.

Rubenstein, D., 2005, Kedokteran Klinis, Erlangga, Jakarta

Sloane, E ., 2003, “Anatomi dan Fisiologi Untuk Pemula”, EGC, Jakarta.

PENENTUAN BILANGAN ASAM DAN BILANGAN PENYABUNAN SAMPEL MINYAK ATAU LEMAK

BAB I PENDAHULUAN

I.1   Latar Belakang

Kelapa sawit bukanlah tanaman asli Indonesia namun dapat hadir, tumbuh dan berkembang dengan baik di wilayah Indonesia. Kelapa sawit mempunyai produk olahan (output) berupa minyak sawit yang menjadi salah satu komoditas perkebunan yang handal. Minyak sawit mempunyai pangsa pasar yang besar baik di dalam maupun luar negeri.

Di samping itu, melihat perkembangan harga minyak sawit di pasaran internasional yang cenderung membaik, industri minyak sawit akan menjadi andalan devisa pada masa yang akan datang. Untuk bisa bersaing di pasar global, perkembangan dan persyaratan perdagangan internasional perlu diantisipasi. Industri minyak kelapa sawit nasional juga mengalami perkembangan yang menggembirakan. Telah terbukti dalam 24 tahun terakhir (1985-2009), pertambahan kebun kelapa sawit mencapai 5 juta hektar atau meningkat 837 persen, dan hal itu juga dibuktikan oleh kontribusi minyak kelapa sawit terhadap ekspor nasional yang mencapai enam persen.

Selama tahun 2005 hingga sekarang, minyak sawit telah menjadi produk minyak makan terbesar di dunia. Konsumsi minyak sawit dunia mencapai 26 persen dari total konsumsi minyak makan dunia. Minyak sawit atau yang dikenal dengan Crude Palm Oil (CPO) merupakan minyak nabati berwarna jingga kemerah-merahan yang diperoleh dari proses ekstraksi daging buah tanaman Elaeis guinneensis (kelapa sawit). Pada umumnya varietas yang digunakan adalah varietas tenera yang mempunyai cangkang yang tipis dan daging buah yang tebal. Proses tahapan ekstraksi minyak sawit ini meliputi tahapan perebusan, perontokan buah dari tandan, pengolahan minyak dari daging buah, dan pemurnian.

Dalam perkembangannya, persaingan perusahaan-perusahaan produsen minyak kelapa sawit mendorong pada pengendalian mutu minyak sawit. Analisa mutu minyak kelapa sawit mentah (CPO) diperlukan untuk menyamakan standar mutu minyak sawit yang diproduksi di Indonesia dengan standar mutu minyak sawit yang diproduksi dunia internsional. Oleh karena itu, minyak sawit harus diproduksi dengan standar mutu yang tepat sehingga mampu bersaing dipasaran dunia.   

Dengan melakukan percobaan penentuan bilangan penyabunan dapat diketahui seberapa besar angka penyabunan dari lemak dalam sampel yang diamati. Sedangkan dalam penentuan bilangan asam, dapat diketahui jumlah asam lemak yang terkandung dalam suatu lemak/minyak. Pada dasarnya kedua uji tersebut bermanfaat untuk menentukan besarnya zat-zat penyusun lemak yaitu gliserol dan asam lemak. Dengan mempelajari tentang lemak kita dapat memaksimalkan pemanfaatan dari lemak itu sendiri serta mencegah bahaya yang dapat ditimbulkan sehingga untuk masa yang akan datang dapat menguntungkan bagi kelangsungan hidup diri kita sendiri ataupun orang lain disekitar kita

I.2 Maksud Praktikum

Untuk mengetahui bilangan asam dan bilangan penyabunan yang terdapat pada sampel minyak atau lemak yang kemudian dapat diketahui kualitas dari sampel minyak.

I.3 Tujuan Praktikum

Adapun tujuan dari percobaan ini yaitu :

a.      Melakukan penetapan asam lemak bebas dari sampel sebagai persentase bobot dari asam lemak bebas yang ada.

b.      Melakukan penetapan bilangan penyabunan yang dinyatakan sebagai jumlah mg KOH yang dibutuhkan untuk menyabunkan lemak atau minyak secara sempurna dari 1 g sampel

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

II.1 Teori Umum

Minyak merupakan salah satu zat makanan yang penting bagi kebutuhan tubuh manusia. Selain itu minyak juga merupakan sumber energi dimana satu gram minyak dapat menghasilkan 9 kkal (Winarno, 2002).

Minyak goreng berfungsi sebagai pengantar panas, penambah rasa gurih, dan penambah nilai kalori bahan pangan. Mutu minyak goreng ditentukan oleh titik asapnya yaitu suhu pemanasan minyak sampai terbentuk akrolein yang tidak diinginkan dan dapat menimbulkan rasa gatal pada tenggorokan. Hidrasi gliserol akan membentuk aldehida tidak jenuh atau akrolein tersebut. Makin tinggi titik asap makin baik minyak goreng itu. Titik asap suatu minyak goreng tergantung dari kadar gliserol bebas. Minyak yang telah digunakan untuk menggoreng titik asapnya akan turun, karena telah terjadi hidrolisis molekul lemak. Karena itu untuk menekan terjadinya hidrolisis, pemanasan minyak sebaiknya dilakukan pada suhu yang tidak terlalu tinggi (suhu penggorengan 177⁰C - 221⁰C). Minyak dan lemak yang dapat dimakan (edible fat), dihasilkan oleh alam yang dapat bersumber dari bahan nabati atau hewani. Dalam tanaman atau hewan, minyak berfungsi sebagai sumber cadangan energi (Winarno, 2002).

Lemak dan minyak dapat terhidrolisis, lalu menghasilkan asam lemak dan gliserol. Proses hidrolisis yang disengaja biasa dilakukan dengan penambahan basa kuat seperti NaOH atau KOH, melalui pemanasan dan menghasilkan gliserol dan sabun. Proses hidrolisis minyak oleh alkali disebut reaksi penyabunan atau saponifikasi (Yazid, 2005).

Angka penyabunan sama dengan bilangan penyabunan dinyatakan sebagai banyaknya ( mg ) KOH yang dibutuhkan untuk menyabunkan satu gram lemak atau minyak. Lemak yang mengandung komponen yang tidak tersabunkan seperti sterol mempunyai bilangan penyabunan rendah. Namun untuk minyak yang mengandung asam lemak tidak jenuh tidak mempunyai bilangan penyabunan tinggi. Tingginya bilangan penyabunan ini disebabkan ikatan tidak jenuh dapat teroksidasi menghasilkan pembentukan gugus karbonil yang pada akhirnya dapat juga bereaksi dengan alkali (Harun, 2006).

      Kandungan asam lemak bebas dalam minyak yang bermutu baik hanya terdapat dalam jumlah kecil, sebagian besar asam lemak terikat dalam bentuk ester atau bentuk trigliserida (Keraten, 2002). Minyak kelapa dapat mengalami perubahan aroma dan cita rasa selama penyimpanan. Perubahan ini disertai dengan terbentuknya senyawa-senyawa yang dapat menyebabkan kerusakan minyak (Ketaren, 2002).

Analisis lemak dan minyak yang umum dilakukan ,dapat digolongkan dalam tiga kelompok tujuan berikut: 1) Penentuan kuantitatif atau penentuan kadar lemak yang terdapat dalam bahan makanan atau pertanian, 2) Penentuan kualitas minyak (murni) sebagai bahan makanan yang berkaitan dengan proses ekstraksinya, atau ada tidaknya perlakuan pemurnian lanjutan misalnya penjernihan, penghilangan bau, penghilangan warna dan sebagainya, 3) Penentuan sifat fisis maupun kimiawi yang khas atau mencirikan sifat minyak tertentu (Riza Julianty, 2008).

Bilangan asam menunjukkan banyaknya asam lemak bebas dalam minyak dan dinyatakan dengan mg basa per 1 gram minyak. Bilangan asam juga merupakan parameter penting dalam penentuan kualitas minyak. Bilangan ini menunjukkan banyaknya asam lemak bebas yang ada dalam minyak akibat terjadi reaksi hidrolisis pada minyak terutama pada saat pengolahan. Asam lemak merupakan struktur kerangka dasar untuk kebanyakan bahan lipid (Agoes, 2008).

Bilangan asam dinyatakan sebagai jumlah milligram KOH 0,1 N yang digunakan untuk menetralkan asam lemak bebas yang terdapat dalam satu gram minyak atau lemak (Ketaren, 2002).

Angka asam besar menunjukan asam lemak bebas yang besar yang berasal dari hidrolisis minyak atupun karena proses pengolahan yang kurang baik.  Makin tinggi angka asam makin rendah kualitasnya. Sedangkan dengan metode Mojonnier, hasil ekstraksi kemudian diuapkan pelarutnya dan dikeringkan dalam oven sampai diperoleh berat konstan, berat residu dinyatakan sebagai berat lemak atau minyak dalam bahan, Minyak yang disusun oleh asam lemak berantai C pendek berarti mempunyai berat molekul relatif kecil (Andry, 2008).

Angka penyabunan (Saponification value) menunjukkan secara relatif besar kecilnya molekul asam-asam lemak yang terkandung dalam gliserida. Titik tolak ukur lain misalnya angka indeks refraksi ,titik cair, angka kekentalan, titik percik (Flash point), komposisi asam-asam lemak, dll (Sudarmadji, 2003).

Asam lemak bebas adalah asam yang dibebaskan pada hidrolisa dari lemak. Terdapat berbagai macam lemak, tetapi untuk perhitungan, kadar ALB minyak sawit dianggap sebagai Asam Palmitat (berat molekul 256). Daging  kelapa sawit  mengandung enzim lipase yang dapat menyebabkan kerusakan pada mutu minyak ketika struktur seluler terganggu. Enzim yang berada didalam jaringan daging buah tidak aktif karena terselubung oleh lapisan vakuola, sehingga tidak dapat berinteraksi dengan minyak yang banyak terkandung pada daging buah. Masih aktif di bawah 15⁰C dan non aktif dengan temperatur diatas 50⁰C. Apabila trigliserida bereaksi dengan air maka menghasilkan gliserol dan asam lemak bebas. Enzim lipase bertindak sebagai katalisator dalam pembentukan trigliserida dan kemudian memecahnya kembali menjadi asam lemak bebas (ALB) (Soerawidjaja, 2005).

Bilangan asam yang besar menunjukkan asam lemak bebas yang besar pula, yang berasal dari hidrolisa minyak atau lemak, ataupun karena proses pengolahan yang kurang baik. Makin tinggi bilangan asam, maka makin rendah kualitasnya (Sudarmadji, 2003).

Bilangan saponifikasi didefenisikan dengan jumlah milligram dari kalium hidroksida (KOH) yang dibutuhkan untuk menyabunkan 1 gram lemak atau minyak. Dalam basis molekuler, sebuah molekul dari miyak atau lemak membutuhkan tiga unit KOH untuk saponifikasi secara sempurna karena disana ada tiga ikatan ester dalam molekul lemak atau miyak karena masing – masing molekul terdiri dari lemak dengan berat molekul tinggi atau lemak dengan berat molekul rendah membutuhkan tiga unit KOH untuk saponifikasi maka berat KOH yang dibutuhkan untuk menyabunkan 1 gram lemak akan lebih mudah untuk lemak yang berat dibandingkan gliserida dengan berat molekul rendah. Lemak dan minyak dengan berat molekul tinggi memiliki bilangan saponifikasi yang rendah dibandingkan lemak dan minyak dengan berat molekul rendah (Lamsihar, 2007 ).

 Bilangan penyabunan adalah jumlah milligram KOH yang diperlukan untuk menyabunkan satu gram minyak dan lemak (Kataren, 2008). Bilangan penyabunan adalah jumlah mg KOH yang dibutuhkan untuk menyabunkan 1 g lemak. Untuk menetralkan 1 molekul gliserida diperlukan 3 molekul alkali. Pada trigliserida dengan asam lemak yang rantai C-nya pendek, akan didapat bilangan penyabunan yang lebih tinggi daripada asam lemak dengan rantai C panjang. Mentega yang kadar butiratnya tinggi mempunyai bilangan penyabunan yang paling tinggi (Winarno,2002) :

Bilangan penyabunan =

II.2 Prosedur Kerja (Anonim, 2015)

a.    Penentuan bilangan asam

Prosedur. Timbang seksama lebih kurang 5,0 gram sampel (lemak/minyak), masukkan ke dalam Erlenmeyer, tambahkan 50 mL alkohol 95% netral. Setelah ditutup dengan pendingin balik, panaskan sampai mendidih dan digojok kuat-kuat untuk melarutkan asam lemak bebasnya. Setelah dingin, larutan lemak di titrasi dengan larutan baku KOH 0,1 N menggunakan indikator fenolftalein (pp). Akhiri titrasi apabila terbentuk warna merah mudah yang tidak hilang selama 30 detik. Apabila cairan yang di titrasi berwarna gelap maka dapat ditambahkan pelarut yang cukup banyak dan atau penambahan indikator bromotimol biru sampai terbentuk warna biru. Hitunglah bilangan asam sesuai persamaan berikut :

Bilangan asam

b.    Penentuan Koefisien Distribusi Fenobarbital

Prosedur. Timbang seksama lebih kurang 5,0 gram sampel minyak atau lemak, masukkan ke dalam Erlenmeyer 200 mL dan  tambahkan 50 mL larutan KOH-etanolik. Setelah ditutup dengan pendingin balik, didihkan secara hati-hati selama 30 menit.. Setelah dinginkan dan tambahkan beberapa tetes indikator fenolftalein (pp) dan titrasi kelebihan larutan KOH dengan larutan baku HCl 0,5 N. Untuk mengetahui kelebihan larutan KOH ini maka lakukan titrasi blanko, yaitu dengan prosedur yang sama tanpa mengandung sampel (lemak/minyak). Hitunglah bilangan penyabunan sesuai persamaan berikut :

Bilangan penyabunan

BAB III METODE KERJA

III.1 Alat Praktikum

Adapun alat yang digunakan pada praktikum ini adalah Alat kondensor, Buret, Corong biasa, Erlenmeyer, Klem, Labu ukur, Pipet volum, Statif dan Timbangan analitik

III.2 Bahan Praktikum

Adapun alat yang digunakan pada praktikum ini adalah Alkohol 95% nertral, Indikator bromotimol biru, Indikator fenolftalein, Larutan baku HCl 0,5 N, Larutan baku KOH 0,1 N, Larutan baku KOH-etanolik, dan Sampel minyak/lemak

III.3 Cara Kerja (Anonim, 2015)

a.      Penentuan bilangan asam

Ditimbang seksama lebih kurang 5,0 gram sampel (lemak/minyak), dimasukkan ke dalam Erlenmeyer, ditambahkan 50 mL alkohol 95% netral. Setelah ditutup dengan pendingin balik, dipanaskan sampai mendidih dan digojok kuat-kuat untuk melarutkan asam lemak bebasnya. Setelah dingin, larutan lemak dititrasi dengan larutan baku KOH 0,1 N menggunakan indikator fenolftalein (pp). Diakhiri titrasi apabila terbentuk warna merah mudah yang tidak hilang selama 30 detik. Apabila cairan yang di titrasi berwarna gelap maka dapat ditambahkan pelarut yang cukup banyak dan atau ditambahkan indikator bromotimol biru sampai terbentuk warna biru. Dihitung bilangan asam

b.      Penentuan bilangan penyabunan

Ditimbang seksama lebih kurang 5,0 gram sampel minyak atau lemak, dimasukkan ke dalam Erlenmeyer 200 mL dan  ditambahkan 50 mL larutan KOH-etanolik. Setelah ditutup dengan pendingin balik, didihkan secara hati-hati selama 30 menit.. Setelah dinginkan dan ditambahkan beberapa tetes indikator fenolftalein (pp) dan dititrasi kelebihan larutan KOH dengan larutan baku HCl 0,5 N. Untuk mengetahui kelebihan larutan KOH ini maka dilakukan titrasi blanko, yaitu dengan prosedur yang sama tanpa mengandung sampel (lemak/minyak). Dihitung bilangan penyabunan

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

IV.1 Hasil

No	Nama sampel	Berat sampel (g)	Vtitran KOH (mL)
1	Susu SGM	5,0	2,7
2	Susu Frisian flag	5,0	6,3
3	Susu SGM	5,057	23,3
4	Susu Frisian flag	5,0	4,5

Penentuan bilangan asam

Dik :

N_KOH        = 0,1 N

1.    Kelompok 1

Bilangan asam

                            

                             = 3,0294

2.    Kelompok 2

Bilangan asam

                            

                             = 7,086

3.    Kelompok 3

Dik :

V_{HCl blanko}           = 41,5 mL

V_{HCl sampel}           = 23,3 mL

N_HCl                       = 0,5 N

Berat sampel = 5,057 g

4.    Kelompok 4

V_{HCl blanko}           = 41,5 mL

V_{HCl sampel}           = 4,5 mL

N_HCl                       = 0,5 N

Berat sampel = 5,0 g

IV.2 Pembahasan

Asam lemak bebas adalah asam lemak yang berada sebagai asam bebas tidak terikat sebagai trigliserida. Asam lemak bebas dihasilkan oleh proses hidrolisis dan oksidasi biasanya bergabung dengan lemak netral. Hasil reaksi hidrolisa minyak sawit adalah gliserol dan asam lemak bebas. Reaksi ini akan dipercepat dengan adanya faktor-faktor panas, air, keasaman, dan katalis (enzim). Semakin lama reaksi ini berlangsung, maka semakin banyak kadar asam lemak bebas yang terbentuk asam lemak bebas dalam konsentrasi tinggi yang terikut dalam minyak sawit sangat merugikan.

Kadar asam lemak bebas dalam minyak kelapa sawit, biasanya hanya dibawah 1%. Lemak dengan kadar asam lemak bebas lebih besar dari 1%, jika dicicipi akan terasa pada permukaan lidah dan tidak berbau tengik, namun intensitasnya tidak bertambah dengan bertambahnya jumlah asam lemak bebas. Asam lemak bebas, walaupun berada dalam jumlah kecil mengakibatkan rasa tidak lezat.

Prinsip kerja bilangan penyabunan adalah sejumlah tertentu sampel minyak/ lemak direaksikan dengan basa alkali berlebih yang telah diketahui konsentrasinya menghasilkan gliserol dan sabun. Sisa dari KOH dititrasi dengan menggunakan HCl yang telah diketahui konsentrasinya juga sehingga dapat diketahui berapa banyak KOH yang bereaksi yang setara dengan asam lemak dan asam lemak bebas dalam sampel. Bilangan penyabunan tersebut adalah banyaknya mg KOH yang diperlukan untuk menyabunkan secara sempurnya 1 g lemak atau minyak. Pada saat percobaan bilangan penyabunan juga digunakan titrasi blanko (titrasi tanpa menggunakan sampel) yang berfungsi untuk mengetahui jumlah titer yang bereaksi dengan pereaksi. Sehingga dalam perhitungan tidak terjadi kesalahan yang disebabkan oleh pereaksi.

Prinsip pada saat melakukan percobaan bilangan asam adalah sejumlah tertentu sampel yang mengandung lemak atau minyak dilarutkan dalam alcohol netral kemudian dipanaskan pada alat kondensor sampai larut, sampel yang telah larut tersebut dititrasi dengan menggunakan basa alkali yang konsentrasinya telah diketahui untuk dihitung bilangan asamnya.

Penentuan asam lemak bebas atau biasa disebut dengan FFA yang merupakan singkatan dari Free Fatty Acid sangat penting kaitannya dengan kualitas lemak. Karena bilangan asam dipergunakan untuk mengukur jumlah asam lemak bebas yang terdapat dalam lemak. Semakin besar angka ini berarti kandungan asam lemak bebas semakin tinggi, sementara asam lemak bebas yang terkandung dalam sampel dapat berasal dari proses hidrolisis ataupun karena proses pengolahan yang kurang baik. Karena proses hidrolisis dapat berlangsung dengan penambahan asam dan dibantu oleh panas. Menurut (Sudarmadji, 1989) angka asam dapat menunjukan asam lemak bebas yang berasal dari hidrolisa minyak ataupun karena proses pengolahan yang kurang baik. Makin tinggi angka asam maka makin rendah kualitasnya.

Sampel yang digunakan pada pengujian kali ini adalah CPO yang telah mengalami pemurnian. Sampel kemudian ditimbang dengan berat 5 gram. Kemudian ditambahkan pelarut alkohol yang kondisi alkoholnya harus netral. Digunakan alkohol netral agar data akhir yang diperoleh benar-benar tepat. Karena bila kondisi tidak netral, titrasi asam-basa akan berakhir dengan diperoleh data yang salah. Sesuai dengan definisi bilangan asam itu sendiri yaitu jumlah miligram KOH atau basa-basa lainnya yang dibutuhkan untuk menetralkan asam-asam lemak. Kemudian pada kedua sampel ditambahkan indikator fenolftalein (PP). Indikator ini merupakan indikator yang sering dipergunakan untuk titrasi asam-basa. Indikator ini akan berubah menjadi merah muda bila suasana basa dan tetap bening jika dalam suasana asam. Karena pada sampel alkohol yang dipergunakan tidaklah netral, maka ketika ditetesi fenolftalein, berubah warna menjadi merah muda. Hal ini berakibat pada penentuan titik akhir yang keliru pula. Setelah itu dititrasi menggunakan KOH 0,1 N yang telah distandarisasi menggunakan asam oksalat sampai timbul warna pink yang tidak hilang setelah 30 detik. Saat itulah titik akhir tercapai. Titik akhir adalah waktu ketika proses titrasi dihentikan karena suasana telah menjadi netral yang ditunjukkan oleh perubahan warna oleh indikator. Penentuan titik akhir dengan tepat pun tidak menunjukkan suasana yang netral karena warna indikator berubah. Oleh karena itu ada yang disebut titik ekuivalen yaitu waktu ketika jumlah titran dengan titrat ekuivalen sehingga suasana benar-benar netral. 

Fungsi penambahan alkohol netral adalah untuk melarutkan lemak atau minyak dalam sampel agar dapat bereaksi dengan basa alkali. Karena alkohol yang digunakan adalah untuk melarutkan minyak, sehingga alkohol (etanol) yang digunakan konsentrasinya berada di kisaran 95-96%, karena etanol 95 % merupakan pelarut lemak yang baik. Fungsi pemanasan saat percobaan adalah agar reaksi antara alkohol dan minyak tersebut bereaksi dengan cepat, sehingga pada saat titrasi diharapkan alkohol (etanol) larut seutuhnya. Pemberian tiga tetes indikator fenolftalein (pp) pada praktikum ini adalah sebagai indikator pembuktian bahwa bahan tersebut bersifat asam atau basa. Pada praktikum ini, setelah dititrasi dengan KOH, larutan alkohol dan minyak kelapa yang telah ditetesi indikator fenolftalein (pp) berubah warna menjadi merah muda. Hal ini membuktikan bahwa larutan tersebut bersifat basa. Penggunaan KOH saat proses titrasi adalah untuk menentukan kadar asam lemak bebas yang terkandung dalam minyak kelapa. Jumlah volume yang digunakan untuk mentitrasi larutan minyak kelapa dan alkohol digunakan dalam proses penentuan asam lemak bebas.

Menurut (Sudarmadji, 2002) angka penyabunan dipergunakan untuk menentukan berat molekul minyak secara kasar. Minyak yang tersusun oleh asam lemak rantai C pendek berarti mempunyai berat molekul relatif kecil yang akan mempunyai angka penyabunan yang besar. Angka penyabunan yang tinggi membutuhkan banyak KOH karena banyak asam lemak berantai pendek. Angka penyabunan merupakan bilangan penyabunan yang dinyatakan sebagai banyaknya milligram KOH yang dibutuhkan untuk menyabunkan 1 gram lemak atau minyak. Penentuan bilangan penyabunan dilakukan untuk mengetahui sifat minyak dan lemak. Pengujian sifat ini dapat digunakan untuk membedakan lemak yang satu dengan yang lainnya.

Dari praktikum yang telah dilakukan diperoleh hasil bahwa bilangan asam untuk sampel susu SGM yaitu 3,0294 dan untuk susu Frisian Flag yaitu 7,0686. Sedangkan bilangan penyabunan untuk sampel susu SGM yaitu 100,95 dan untuk susu Frisian Flag yaitu 207,57.  Menurut literatur range untuk bilangan penyabunan yaitu  200-205 sehingga dapat dikatakan bahwa sampel susu SGM memenuhi syarat tetapi sampel susu Frisian Flag tidak memenuhi syarat, sedangkan untuk bilangan asam syarat range yaitu 2-7 sehingga dapat dikatakan bahwa sampel susu SGM memenuhi syarat tetapi sampel susu Frisian Flag sudah melewati range batasan maksimum (tidak memenuhi syarat).

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

V.1 Kesimpulan

Berdasarkan percobaan yang telah dilakukan, maka dapat disimpulkan sebagai berikut :

1.       Bilangan asam untuk sampel susu SGM yaitu 3,0294 dan untuk susu Frisian Flag yaitu 7,0686.

2.       Bilangan penyabunan untuk sampel susu SGM yaitu 100,95 dan untuk susu Frisian Flag yaitu 207,57. 

3.       Menurut literatur range untuk bilangan penyabunan yaitu  200-205 sehingga dapat dikatakan bahwa sampel susu SGM memenuhi syarat tetapi sampel susu Frisian Flag tidak memenuhi syarat, sedangkan untuk bilangan asam syarat range yaitu 2-7 sehingga dapat dikatakan bahwa sampel susu SGM memenuhi syarat tetapi sampel susu Frisian Flag sudah melewati range batasan maksimum (tidak memenuhi syarat).

V.2 Saran

Disarankan agar asisten mendampingi praktikan selama praktikum, agar sekiranya prosedur pengerjaan sesuai yang diharapkan sehingga mendapatkan hasil yang tepat dan akurat tanpa adanya faktor kesalahan 

DAFTAR PUSTAKA

Agoes, G., 2008, Pengembangan Sediaan Farmasi Edisi Revisi dan Perluasan, Penerbit ITB, Bandung

Andry, 2008, Teknologi Lemak Dan Minyak, http://www.pdf-search-engine.com

Harun, N., 2006, Penuntun praktikum kimia sawit, Universitas Jambi, Jambi

Julianty, Riza, 2008, Analisis Kadar Lemak, http://www.pdf-search-engine.com

Ketaren, S., 2002, Pengantar Teknologi Minyak dan Lemak Pangan Cetakan Pertama, UI-Press, Jakarta

Lamsihar, G., 2007, Laporan Penelitian Saponifikasi, USU, Medan

Soerawidjaja, T., 2005, Mendorong Upaya Pemanfaatan dan Sosialisasi Biodiesel Secara Nasional , Makalah disampaikan pada pertemuan duabulanan ke-3 LP3E KADIN Indonesia, Jakarta

Sudarmadji, S., 2003, Analisa Bahan Makanan dan Pertanian, Penerbit Liberty, Yogyakarta

Winarno, F., G., 2002, Kimia Pangan dan Gizi, Gramedia Pustaka Utama, Jakarta

Yazid, E., 2005, Kimia Fisika untuk Paramedis, Penerbit Andi, Yogyakarta

LAMPIRAN

Skema Kerja

Timbang 5 g sampel (lemak/minyak)

Penentuan bilangan asam

Masukkan ke dalam Erlenmeyer

Setelah dingin, larutan lemak di titrasi dengan larutan baku KOH 0,1 N menggunakan indikator fenolftalein

Apabila cairan yang di titrasi berwarna gelap ditambahkan pelarut yang cukup banyak indikator bromotimol biru sampai terbentuk warna biru. Hitung bilangan asam

Setelah ditutup dengan pendingin balik, panaskan sampai mendidih dan digojok kuat-kuat

Akhiri titrasi apabila terbentuk warna merah mudah yang tidak hilang selama 30 detik

Tambahkan 50 mL alkohol 95% netral

Penentuan bilangan penyabunan

Tambahkan 50 mL Larutan KOH-etanolik

Dinginkan dan tambahkan beberapa tetes indikator fenolftalein

Hitung bilangan penyabunan

Timbang 5 g sampel (lemak/minyak)

Masukkan ke dalam Erlenmeyer

Titrasi kelebihan KOH dengan larutan baku HCl 0,5 N

Setelah ditutup dengan pendingin balik, didihkan dengan hati-hati selama 30 menit